LS_T 6108-2014 粮油检验 谷物中黄曲霉毒素B1的快速测定 免疫层析法
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8 |
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日期： |
2024-8-11 |
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ICS 67.060,B 20,备案号:44929—2014 LS,中华人民共和国根食行业标准,LS/T 6108—2014,粮油检验,谷物中黄曲霉毒素B1的快速测定,免疫层析法,Inspection of grain and oils-Rapid test of aflatoxin B, in cereal-,Immunochromatography method,2014-04-28 发布2014-06-01 实施,国家粮食局 发布,LS/T 6108—2014,刖 R,本标准按照GB/T 1.1-2009给岀的规则起草.,本标准由全国粮油标准化技术委员会(SAC/TC 270)归ロ,本标准起草单位:湖北省粮油食品质量监测站、国家粮食局标准质量中心、北京市粮油食品检验所、,重庆市根油质量:监督检验站、广西壮族自治区粮油质量监督检验站.,本标准主要起草人:熊宁、刘坚、杨R民、郭健、柳永英、邹勇、彭超、刘利、刘勇、倪姗姗、吴莉莉,I,LS/T 6108—2014,粮油检验,谷物中黄曲霉毒素B1的快速测定,免疫层析法,1范围,本标准规定了谷物中黃曲雷毒素B的関标记免疫层析法和胶体金免疫层析法的原理、试剂及材,料、仪器及设备、样品制备、样品测定、结果判定,本标准适用于大米、糙米、玉米等谷物中黄曲霉毒素B1的快速筛査,2规范性引用文件,下列文件对于本文件的应用是必不可少的,凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文,件。凡是不注H期的引用文件,其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件.,GB 2761食品安全国家标准食品中真菌毒素限鼠,GB 5491粮食、油料检验托样、分样法,GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法,3酶标记免疫层析法,3.1原理,本方法基于特异性抗原抗体反应和免疫层析技术,以艇作为载体,采用双抗夹心法的反应原理，样,品经甲醇溶液提取,将提取液过滤或离心、稀释后,加入检测卡中,样品中黄曲霉毒素Bi会与固相载体,上的抗体结合后再与检测带上的醐标抗体结合,使检测带显色。通过检测带是否显色及显色时间长短,来判定样品中黄曲霉毒素BI的含最,3.2 试剂及材料,除另有说明外,所用试剂均为分析纯,实验室用水应符合GB/T 6682中一级水,3.2.1 黄曲霉毒素Bi醐联免疫检测卡”:检测卡的性能应满足附录A的要求。不同品牌不同批次的检,测卡使用前,应按照附录A进行检测卡性能测定,3.2.2 70%甲醇溶液:取70 mL甲醇加30 mL水混合,3.2.3 瑣酸氢二钠（Na?HPO3,3.2.4 氯化钠（NaCD.,3.2.5 氯化钾（KCD,3.2.6 浓盐酸（HCD.,1）维国拜发公司生产的黄曲靄毒素B,解我免疫检测卡是当前应用较为广泛的快速检测卡.提供此信息只是カ,了方便本标准的使用者.不代表本标准对该产品的认可.任何可以满足本标准附录A规定的检测卡均可,使用,LS/T 6108—2014,3.2.7 PBS缓冲液:分别称取1.42 g磷酸氢二钠、8 g氯化钠、0.2 g氯化钾,加800 mL水充分搅拌溶,解,加入浓盐酸谢整pH至7.4,用水定容到1 L.,3.3 仪器及设备,除实验室常规仪器设备外,应注意下列仪器设备.,3.3.1 天平:分度值。.01 g,量程210 g.,3.3.2 粉碎机,3.3.3 离心机:转速 4 000 r/min9,3.3.4 振荡器,3.3.5 计时器,3.3.6 离心管.,3.4 样品制备,3.4.1 拝样与分样:按GB 5491执行,3.4.2 样品粉碎:将被测样品粉碎至全部通过20日筛,充分混合均匀,3.4.3 待渕溶液制备:准确称取粉碎后的样品（3.4.2）10.0 g于离心管中,加入20 mL 70%甲醇溶液,（3.2.2）。振荡提取3min.5 min,静置3 min,过滤或离心得上清液。取100 *L常温ド的PBS缓冲液,（3.2.7）与50 上清液混合,此溶液为待测溶液.,注:林样前应充分混合样品,保证待测样品的代表性.,3.5 样品测定,取待测溶液（3.4.3）100 'L加到檢测卡（3.2.1）的点样小孔中,开始计时,在16 min内分三次判读,结果,注:检测卡在毎次检测时应岀现质控色带,质控色带在加样后最迟2 min内显现.,3.6 结果判定,3.6.1 无效,质控色带不显色,此检测卡无效,需用新检测ド重新进行检测.,3.6.2 阴阳性样品,质控色带显色,检测色带在不同时间显色,表示样品中黄曲霉毒素B,含量不同.如检测色带在,4 min后显色,样品中黄曲霉毒素含量约为20 Mg/kg;检测色带在8 min后显色,样品中黄曲有毒素,B,含量约为!0 Mg/kg;检测色带在16 min后显色,样品中黄曲富毒素B,含量约为4 pg/kg0,根据GB 2761中规定的各种根食中黄曲霉毒索B.限量标准来判定样品阴阳性,需对本方法麻査出来的阳性样品进行确认时,应采用GB 2761中规定的方法,4鮫体金免疫层析法,4.1 原理,本方法基于特异性抗原抗体反应和免疫层析技术,以胶体金作为载体,采用竞争法的反应原理丒样,品经乙酸乙酯提取,提取液经过滤或离心、吹干、稀释后,加入检测卡中,样品中的黄曲带毒素B,会与,2,LS/T 6108—2014,胶体金标记的特异性抗体结合,使检测色带不显色。通过检测色带是否显色来判定样品中黄曲蠶森素,B,的含蛇,4.2 试剤及材料,除另有说明外,所用试剂均为分析纯,实验室用水应符合GB/T 6682中一级水丒,4.2.1 黄曲霉毒素B）胶体金检测卡检测卡的性能应满足附录A的要求。不同品牌不同……
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